捷克拥有欧洲最密集的铁路网络之一,铁路总长超过 9,500 公里。国家运营商捷克铁路公司(České dráhy)以及私营准入运营商 RegioJet 和 Leo Express 提供频繁的列车服务,将布拉格与主要区域中心连接起来。主干线连接布拉格中央车站(Praha hlavní nádraží)与帕尔杜比采、奥洛穆茨和奥斯特拉瓦,年客运量超过 2000 万人次。高速摆式列车(Pendolino)从布拉格行驶至奥斯特拉瓦只需 3 小时 15 分钟,最高时速可达 160 公里。
国际线路将布拉格与柏林(4.5 小时)、维也纳(4 小时)和布达佩斯(7 小时)直接相连。捷克铁路公司在这些跨境线路上采用现代化的 Railjet 和 ComfortJet 列车组,而 RegioJet 则提供前往维也纳和布拉迪斯拉发的极具竞争力的替代方案。在国内,较慢的区域快车(Rychlík)和普通慢车(Os)将大城市与乡村城镇连接起来。可靠的铁路基础设施使得布拉格、布尔诺和比尔森之间的旅行非常准时,主要旅游路线上的列车每 30 至 60 分钟就有一班。